簡要描述:美國ABI 7300型熒光定量PCR儀
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ABI 7300型實時熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。ABI 7300將PCR熱循環(huán),熒光檢測和各種應用分析軟件結(jié)合在一起,可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應管中PCR擴增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實驗結(jié)束后可以馬上得到定量結(jié)果,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產(chǎn)物,無需進行任何實驗操作。ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)采用96孔反應板或單個及8聯(lián)管,反應體積25-100微升,實驗可以在不到2小時內(nèi)結(jié)束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比,ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省,靈敏度高,準確性好和線性范圍寬等優(yōu)點。ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)由實時定量PCR技術(shù)的*—美國應用生物系統(tǒng)公司于2004年1月推出,它質(zhì)量優(yōu)異,實驗結(jié)果準確可信,性能價格比極其*。
實時定量PCR的主要應用:
實時定量PCR應用廣泛,包括基于相對定量分析的基因表達分析,以標準曲線為基礎的病原體定量分析,定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析,以及以陽性內(nèi)對照為基礎的陽性/陰性結(jié)果判定。
實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP?操作系統(tǒng),進行儀器控制,數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析,軟件功能強大,界面友好,包括如下特色:
? 反應板設置指南,使實驗設計非常簡單,即使是復雜的多重定量實驗也是如此。
? 擴增反應曲線的實時監(jiān)測
? 自動設定熒光基線,自動計算熒光閾值使實驗結(jié)果分析大大簡化
? 采用標準曲線進行靶基因的定量
? 基因表達相對定量軟件提供強大的結(jié)果分析顯示,可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數(shù)據(jù)同時分析,并自動去除無關項數(shù)據(jù),該軟件為選購件
? 自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結(jié)果并自動進行分型質(zhì)量評分
? 解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便,可以在儀器運行時觀察解離曲線數(shù)據(jù)
? 觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置
? 光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序
四色熒光同時檢測支持各種應用需要,包括:基因表達分析,病原體定量,SNP基因分型檢測和采用管內(nèi)陽性對照的陽性/陰性結(jié)果檢測
? 強大而靈活的軟件包括反應板設置指南,更良好的實驗結(jié)果顯示與自動分析工具使實驗數(shù)據(jù)的分析處理更簡單直觀
? 精確的光路設計與超低溫CCD成像和良好的多組分熒光自動分析校正軟件,使實驗結(jié)果更準確更可靠,實驗結(jié)果的重現(xiàn)性更好
? 型半導體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應管
? 體積小使用方便,適用于任何空間的實驗室
熒光信號檢測:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔同時被鹵鎢燈激發(fā),激發(fā)的熒光通過四色光學濾鏡后到達CCD照相機檢測信號。四色濾光片能夠有效地分辨包括
FAM?/SYBR? Green I,VIC?/JOE?,TAMRA?,和ROX?在內(nèi)的多種熒光染料。多色熒光檢測技術(shù)可實現(xiàn)多重定量、SNPs基因型分型和帶有內(nèi)部陽性對照的陰/陽性分析成為可能。
熱循環(huán)系統(tǒng) 新型半導體,96個樣品孔
光學系統(tǒng) 單一激發(fā)光源,四色熒光濾光片和超低溫CCD成像系統(tǒng)
Run Variables
定量PCR運行時間 2 小時
樣品管類型 96孔板或0.2-mL單管
反應體積 25–100 微升
電腦技術(shù)指標:
美國應用生物系統(tǒng)公司為ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供配套的Dell?商用系列電腦(客戶可以選擇手提電腦或臺式電腦.
安裝技術(shù)指標:
在使用TaqMan?的RNA合成酶P儀器安裝板的情況下,ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)能夠區(qū)分5,000和10,000模板拷貝數(shù),其置信度高達99.7%
儀器性能:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過驗證可以達到如下性能目標:
· 9個數(shù)量級的線性范圍
·可以檢測50ul反應體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數(shù)的模板,其置信度高達99.7%
試劑與消耗品:
ABI 7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)可使用全套定量PCR試劑與消耗品,包括:TaqMan? PCR通用預混試劑, SYBR? Green I預混試劑,96孔反應板及0.2ml反應管
TaqMan? Assays-on-Demand? and TaqMan? Assays-by-Design?應用試劑盒:
美美國應用生物系統(tǒng)公司為7300型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供各種配套的TaqMan定量PCR應用試劑盒,這些試劑盒均經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,可以拿來直接使用。
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